AMCA-SA 是通过共价键将 7-氨基-4-甲基香豆素(AMCA,蓝色荧光染料)与链霉亲和素(SA)偶联形成的荧光-蛋白偶联物,具备高特异性结合活性、蓝色荧光适配性、低背景干扰及便捷储存使用等核心特性,是多色荧光检测中蓝色通道特异性标记的关键工具。
链霉亲和素对生物素(Biotin)具有极强的亲和力,解离常数 Kd 约为 10⁻¹⁵ M,偶联 AMCA 后其生物素结合位点活性未受影响,特异性结合率超过 97%,可借助“生物素-链霉亲和素”系统精准靶向生物素标记的目标分子。
AMCA 可发射特征性蓝色荧光,激发波长为 350nm,发射波长为 442nm,荧光量子产率约 0.52,摩尔吸光系数达 19000 M⁻¹cm⁻¹。尽管其亮度低于 AF 系列染料,但蓝色光谱区间与绿光(如 AF488)、红光(如 AF594)无重叠,是多色荧光检测中“蓝色通道”的核心标记工具。
链霉亲和素经 AMCA 修饰后,表面亲水性得到优化,对细胞、组织切片的非特异性吸附率低于 5%,且 AMCA 自身无明显细胞有害性,适用于活细胞与固定样本的标记。
该偶联物通常以 0.5-1mg/mL 的 PBS 缓冲液(含 0.01% 叠氮钠防腐剂)形式储存,在 2-8℃避光条件下保质期为 12 个月。使用时无需额外活化,可直接与生物素标记的核酸、抗体或蛋白孵育,孵育温度为 25℃,时间为 30 分钟,适配免疫荧光、流式细胞术、荧光原位杂交(FISH)等技术。